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[香樟树]番红花型樟树芽的诱导和增殖

发布日期:2019-11-28 06:51:55
  为了促进the树型樟脑型工业原料林的发展,以soft树状的柔软樟脑树分支为外植体,对树香樟群苗进行了关键技术研究。
  果表明,滤纸 培养液方法可以有效抑制外植体的褐变。用于树型樟脑芽培养的基础培养基是EC(ER 120 mg / L Ca(NO3)2),它适合芽。生激素的组合和浓度比为:6-BA 6.0 mg / L ANS 3.0 mg / L ZT 0.5 mg / L,进行25-30天的二次培养,芽的增殖系数为5.7; EC 6-BA 3.0毫克/升 NAA 1.5毫克/升 L-半胱氨酸15毫克/升所生长的芽是健壮而有效的芽18.3植物/瓶。红花是重要的天然香气。中国,黄樟脑主要是从肉桂植物的精油中提取的[1-2],纯天然黄樟脑具有自然的气味并且很香。是茉莉,胡椒基丁基醚,胡椒基丙酮,香料的合成醛。色颜料等产品的理想原料也是重要的医药中间体,广泛用于工业生产中,如增白剂,香料和医药[3-5]。于对以黄樟脑为原料合成的产品的需求不断增长,长期以来,国际市场对黄樟脑的供求关系一直很少,其年商业量在3000至3500吨之间波动,主要在该地区。自中国和巴西。南美的产量不到2,000吨[6]。前,黄樟脑通常是从岩石树枝或根和樟脑树干的精油中提取的。是,烟桂生长缓慢,枝叶产量低,生产资源有限,限制了黄樟脑的开发和使用。用组织培养无性繁殖技术培育苗木,藏红花型樟脑树无性系的观赏性栽培是黄樟脑的快速发展。品质的行业有效途径。

番红花型樟树芽的诱导和增殖_no.67

  者根据the木石油公司的“ QB / T1032-1991”标准对广西省Province木类型的樟脑资源进行了调查,并调查了其枝叶的生长。于1.5%且大于90%的快速生长,直生,成熟的樟树的优良单株植物,枝叶茂密,被用作外植体,通过诱导和繁殖研究组织培养技术。以期工业化开发优良的藏红花型樟脑苗。供技术支持。验材料取自广西南宁市良庆区樟树的优良单株,树龄为3年,叶片含油率在1.5%以上。
  者的黄樟脑大于90.1%。晴朗的天气中,连续三天以上,收集到的上冠的外部分支没有病虫害或寄生虫,首先将幼芽在流水下冲洗10-15分钟,切下叶子吸收了0.1%甲氨基阿维菌素苄基。溶液15至20分钟,用纯水洗涤3至4次,将嫩枝切成2〜3 cm的茎片(有1个腋芽或更多),并根据程度放入容器中茎段木质化,清洁工作用3%NaClO灭菌8-15分钟,用无菌水洗涤3-4次,并在含有30 mg / L盐酸的0.1%HgCl2溶液中灭菌亚硫酸钠和30 mg / L抗坏血酸。18分钟后,用无菌水清洗3-4次,对滤纸进行消毒,香樟树以吸收茎表面的水分并将其播种到培养基中。灭菌后的外植体接种到三种培养基中:A(滤纸 培养液),B(细沙 培养液)和C(琼脂粉3.8 g / L 培养液)。养液的配方:ER 6-BA 3 mg / L NAA 1.5 mg / L VC 60 mg / L 活性炭100 mg / L,每次处理接种45支试管,每支接种1种测试材料试管,总共135管,在第15天接种统计外植体褐变次数,计算外植体的褐变率。
  用L9正交表设计测试(34)。个处理由250ml锥形瓶组成,每个烧瓶用外植体接种,重复3次,并培养30天以观察和记录芽的形态特征并计算发芽率。诱导的芽接种到芽生长培养基中:EC基础培养基(ER 120 mg / LCa(NO3)2)补充有6-BA 5.0、6.0、7.0 mg / L,ANA 2.0、3.0和4.0 mg / L。KT 0.5 mg / L和ZT 0.5 mg / L,使用完全随机的方框图,进行12种处理,每种处理均接种90个纽扣,重复3次,新纽扣的数量为一个高度≥0.3厘米计数30天,并计算扩散系数。开丘疹后,将其插入生长培养基:EC基础培养基中,然后添加6-BA 2.0、3.0、4.0 mg / L,NAA 0.5、1.5、2 ,5 mg / L和ZT 0.5 mg / L。设计完全随机,有9种治疗方法。适当的培养基中添加5、10、15、20 mg / L的L-卤代蛋氨酸,每次处理接种10瓶(500 ml锥形瓶),每瓶接种5束纽扣,每束接种6枚纽扣。复3次并培养35天,以计算大于2厘米的单芽数并计算有效芽数。养基中含有30 g / l的糖,3.8 g / l的pH 5.5-5.8琼脂粉。源是散射的自然光,光强度为800〜6000 Lx,照明时间为10〜14 h / d,培养室的湿度为60%70%,温度为22〜25。用Excel 2007进行数据处理和绘图,DPS软件对数据进行统计分析。assa树富含芳香物质,外植体被剪切,芳香物质在伤口中迅速氧化形成醌,导致外植体褐变。验。灭菌后的茎段垂直插入A,B和C中。中,将接种A的茎段通过滤纸,并使基体与培养液接触。果图1显示,外植体褐变率的顺序为B> C> A。处理B中,外植体的漂白很严重,褐变率为78.92%,这可能是由于排空沙子,增加氧气。重致命。理A的褐变率仅为16.73%,这是三种处理中最低的。
  可能是由于以下事实:外植体在培养基中培养,溢出在外植体底部切口处的芳香物质的局部浓度被稀释,而抗坏血酸为稀释。过将植物的一部分分泌物氧化而产生的醌起作用,并再次还原为酚。以向培养基中加入抗氧化剂,例如焦亚硫酸钠,L-半胱氨酸,抗坏血酸,柠檬酸和二硫苏糖醇,以与醌的氧化产物相互作用并将其还原为苯酚[ 7]。性炭还可以吸附某些酚和醌,有效降低外植体褐变速率。表2所示,四种测试因子对外植体启动的影响顺序如下:基础培养基> 6-BA> KT> NAA。基础培养基之间,外植体中芽萌发的诱导速率存在显着差异,并且对芽诱导的影响顺序为EC> ER> 1 / 2EC。EC培养基的芽萌芽诱导率分别比ER和2EC高18.4%和25.8%。EC基础培养基更适合早期外植体的营养需求:基于RE 2向幼苗中添加120 mg / L Ca(NO3)。方面,它可以为幼苗提供更多的Ca2 。NO 3可以吸收植物的K ,Ca 2 ,Mg2 和其他阳离子[8],另一方面,它有利于外植体初生芽的木质化,并提高了初生芽的诱导率。1 / 2EC培养基中的营养物质太少,无法满足外植体发芽和生长所需的营养物质,因此芽萌发率很低。6-BA 3水平之间没有显着差异,但在7.5 mg / L时的平均初始芽诱导率为60.1%。全比较分析理想的培养基如下:2种EC 6-BA 7.5 mg / L 2.5 mg / L KT 1.5 mg / L处理,外植体起始率为78 ,6%。3的结果表明,当6-BA的质量浓度从5 mg / L-1增加到6 mg / L-1时,芽的增殖系数也增加,并且6-BA的质量浓度为以7 mg / L-1提及。常的增殖芽相应地减少:在相同质量浓度的6-BA下,当NAA的质量浓度从2 mg / L-1增加到3 mg / L-1时,芽的增殖系数增加。NAA质量浓度达到4 mg。/ L-1时,芽愈伤组织显着增加,甚至发生芽玻璃化,这严重影响了正常芽的生长:用10、11和12号处理的愈伤组织更不利于芽的生长。殖和芽培养。理4和6具有较高的增殖系数和正常生长,但是最理想的处理是第五种处理,其增殖系数高达5.7并且生长强劲。2.3.5处理的培养基中,S木油型樟脑芽连续生长3至4代,然后逐渐减少。
  培养过程中要获得越来越多的芽,在2.3.5中处理的培养基的基础。种组合和浓度比的调整试验。4中的结果表明6-BA和NAA的质量浓度太低或太高均不能促进有效芽的形成,并且6-BA和NAA的质量浓度的适当比例可以促进芽的形成。效芽。NAA为0.5 mg / L时,分别在4、6和8上用1、2和3号处理6-BA / NAA。

番红花型樟树芽的诱导和增殖_no.56

  不发育,芽呈棕色。NAA为2.5 mg / L时,分别对7、8和9分别进行处理的0.8、1.2和1.6的6- BA / NAA处理显示出更强的枝条提取能力,但是较弱,叶子变小,它们的发育不那么强烈,有褐变;在1.5 mg / L的高NAA浓度下,6 -BA / NAA的质量浓度比分别为4、5和6处理,分别为1.3、2.0和2.7。理4和6中较高的芽更多,但是在芽的尖端的叶子上发生褐变。长良好,芽效率更高,但培养30天后一些简单的芽浅褐色:用10、11和12号处理的芽的愈伤组织很丰富,不利于芽的旺盛培养。钮。面分析表明,质量浓度比为5和6-BA / NAA的处理为2.0,最适合发芽培养。了减少芽褐变,在上述实验的基础上,添加了强壮的芽培养物(EC 6-BA 3.0 mg / L ANA 1.5 mg / L),以及不同浓度的L-Hemiline。养基中L-半胱氨酸的质量浓度逐渐增加5 mg / L,有效芽数呈抛物线形;当L-半胱氨酸质量浓度为15 mg / L时,香樟树有效芽数最高的平均值(18.3(植物/烧瓶),芽生长旺盛,芽的繁殖繁殖和芽的有效生根效果都很好,但是当L的质量浓度为-半胱氨酸增加,芽的木质化程度降低,叶子变钝且染成浅绿色,有效芽的数量相应减少(见图2)。S木樟树芽(外植体)进行灭菌和测试根据测试的1.2.2节所述的介质A,B和C具有抑制外植体褐变和褐变的作用,其比率为15.6%,随后是褐变率a碳含量为46.3%,最差的是B,褐变率高达78.6%。C抑制外植体褐变的效果比A差。因可能是培养基C中外植体碱基分泌的酚几乎集中在其周围,而C的影响某些抗氧化剂的浓度是有限的。性炭被削弱后,吸附有害物质的能力有限,苯酚与醌的反应仍在继续,最后,由于醌的浓度增加,外植体被中毒并镀金。于低浓度和低添加的抗坏血酸/活性炭比,C处理是否会影响褐变抑制效果需要进一步研究。第2.2节中可以明显看出,中度或低度营养素1/2 EC对樟脑外植体的芽诱导没有积极作用:诱导的芽较弱,呈黄色,叶片较弱。易跌倒。可能是由于营养不足,尤其是Ca2 含量不足[8]。EC培养基中添加了基于ER的150 mg / L Ca(NO3)2。在第5天开始发芽。适合芽增殖的培养基是EC 6-BA 6.0 mg / L ANA 3.0 mg / L ZT 0.5 mg /L。替周期为25-30天,增殖系数为5.7。3表明,在补充0.5 mg / LKT的10、11和12处理中接种了次生芽,第一代培养物对新芽的萌发效果比浓度为0更好。5 mg / L的ZT。过第二代和第三代培养基的连续培养后,一些芽逐渐出现愈伤组织,影响了芽的正常分化和生长。严重的情况下,芽已玻璃化或镀金。可能是由于0.5 mg / L的过高的KT所致,随着传代次数的增加,其对细胞分裂促进细胞分裂的作用也增加。于次生芽的二次培养而言,合适的KT浓度需要额外的实验研究。以下芽中添加3.0 mg / L EC-6-BA 1.5 mg / L NAA培养基,并添加15 mg / L L-半胱氨酸。养期为35至40天,芽的末端不是金棕色。50%的叶子被展开,芽更有效,为18.3株/瓶。可能是因为15 mg / L的L-半-光氨酸可以有效抑制芽中酚类物质的醌形成。
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