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樟脑籽仁油对非酒精性脂肪性肝病小鼠肝脏脂肪

发布日期:2019-12-31 06:38:10
  摘要:目的观察樟脑籽仁油对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型小鼠肝脂质和肝功能的影响,并探讨其相关机制。法将十只实验小鼠随机分为两组:正常组和八种脂肪肝模型。模型组的小鼠喂食MCD 6周,以成功构建NAFLD模型。模型小鼠分为4组:自然恢复组,樟树。种子油组,猪油组和大豆油组喂磷酸盐缓冲液,油。
  脑种子,猪油和大豆油分别以200μL/头的剂量持续4周。整个实验过程中,基本食物和水自由消费。

樟脑籽仁油对非酒精性脂肪性肝病小鼠肝脏脂肪和肝功能影响的研究_no.101

  果与正常组相比,模型组小鼠运动缓慢,活动减少,体重减轻,大便有明显的脂肪感,肝色为浅黄色。模型组相比,樟脑籽仁组中的肝甘油三酯和胆固醇含量大大降低。指数和组织病理学分析表明,樟脑籽仁油可以抑制肝脂肪的沉积。论樟树籽油能有效降低NAFLD小鼠的血脂水平,有利于肝功能的恢复。具有保护肝脏的作用,并为患有这种疾病的患者提供了食用油的基准。树是中国特殊的经济珍贵树种[1],不仅具有良好的绿化价值,而且还富含天然樟脑和芳香油等药用物质。有极高的药用价值。脂的开发和合理使用使其难以充分利用油脂并浪费资源。前的研究表明,樟脑种子的含油量高达40%或更高,所含的脂肪酸类型包括:辛酸,癸酸,月桂酸等。[2]。着研究的进展,发现与普通植物油不同,樟脑籽仁油中癸酸(C10)和月桂酸(C12)的含量相对较高,占90以上。%,这是中碳链油的天然资源。
  此,可以从樟脑种子的仁油中合成功能性油-中碳链甘油三酸酯及其衍生物[3-5]。内外相关的动物实验表明,在食物中添加中等碳链甘油三酸酯可以增加热能并减少脂肪沉积[6]。等甘油三酸甘油酯的功能是为食物提供能量和营养,而又不影响食物的风味[7],并具有独特的代谢模式和特殊的保健功能,因此受到人们的青睐。去的几年。的特殊代谢方式是中链甘油三酸酯在被人体分解后变成中链脂肪酸[8]。为碳链短且不依赖肉碱转运蛋白的运输,所以它会迅速氧化并且不容易使组织脂肪化。在肝脏组织中积累是因为其代谢速率比长链甘油三酸酯快,并且不容易合成甘油三酸酯,因此不容易将其沉积在肝脏中,并且肝脏代谢的压力降低了[9]。为食物中的天然成分,中碳链甘油三酸酯,中链脂肪酸在脂质代谢中的益处已成为近期研究的主题。NAFLD持续性疾病以肝细胞脂质过多为特征,不仅是中国慢性肝病和异常肝酶异常的主要原因,而且还是各国肝功能障碍和慢性肝病的主要原因西方人[10]。NAFLD的病因机制包括大量游离脂肪酸的增加,游离脂肪酸的β-氧化的减少和脂质过氧化的增加。
  食因素会影响各种肝脏疾病(例如NAFLD)中的脂肪渗透和脂质过氧化作用,并且NAFLD的饮食疗法[11]强调严格控制卡路里摄入和控制卡路里摄入。物中的脂质,蛋白质和碳水化合物的摄入量。究表明,过量摄入饱和脂肪酸会损害内质网,脂肪肝疾病和炎症。

樟脑籽仁油对非酒精性脂肪性肝病小鼠肝脏脂肪和肝功能影响的研究_no.59

  
  食脂肪摄入不当,碳酸饮料摄入过多,胰岛素抵抗和氧化应激增加导致游离脂肪酸向肝脏的运输增加以及肝脏甘油三酸酯的积累增加。有NAFLD的患者通常会有不规则的不良饮食习惯,并热衷于高温,高脂肪,重口味的饮食,这会导致体内脂肪的过多积聚并加速脂肪形成和形成。NAFLD的恶化。碳链甘油三酸酯不容易沉积在肝脏中,香樟这可以降低肝脏代谢的压力。外,中碳链甘油三酸酯是一种安全,无毒的物质,可以大大减轻体重。代谢途径独特,能量供应迅速。该实验中,使用了NAFLD模型的建立,甘油三酸酯的定量测定,总胆固醇的定量测定和苏木精-曙红染色。索摄入一定量的樟脑籽仁油是否可以改善NAFLD小鼠肝脏中脂质的积累并改善肝功能,以探索新的油而不影响其消耗。和改善食物的风味,积极有效地纠正体内的能量失衡。济南鹏跃实验动物育种有限公司繁殖了十只健康的C57BL / 6J小鼠,雄性,体重12-25 g,动物许可证号:SYXK(Lu)2016 0008。MCD模型食品(基于AIN93G,10%玉米油,高糖)由南通特罗菲饲料有限公司加工制造。
  合实验动物饲料卫生标准。本成分:玉米,小麦,大豆油,百分之十,鱼粉,磷酸氢钙,维生素,矿物质等,营养成分的保证值(%):水分≤100,粗蛋白≥220,材料粗脂肪≥40,粗纤维≤50,粗灰分≤80,钙10-18,磷6-12,赖氨酸≥13.2,蛋氨酸7.8和胱氨酸7.8。南鹏跃实验动物繁育有限公司樟脑籽油由南昌大学实验室提供,大豆油,猪油,无水乙醇,TG和TC试剂盒(南京建城生物技术研究院),酶标仪HBS-1096A,电子天平,生化培养SPX-250 Box,低速TD5A台式离心机。应性喂养1周后,根据体重将小鼠随机分为2组。就是说:对照组(n = 2),非酒精性脂肪肝模型组(n = 8)。照组始终饲喂标准食品。NAFLD模型组喂食MCD模型食物,喂食6周后,通过肝HE染色,油红O染色以及检测TG和TC含量来确定肝脂肪变性模型的建立。据随机数方法,将成功构建的NAFLD模型小鼠分为4组,即樟脑种子核组,猪油组,大豆油组和自然恢复组。大豆油,自然恢复组和对照组接受了磷酸盐缓冲液,初始容量为100 µl /头。过一周的小鼠适应过程后,剂量增加到200 µl /头。
  验期间为4 W,在此期间小鼠可以自由进食和饮水,并定期观察和测量相应的指标。验后,从小鼠的眼球中抽血,并将颈椎脱臼并处死。含75%酒精的棉球对小鼠的腹部皮肤进行消毒。

樟脑籽仁油对非酒精性脂肪性肝病小鼠肝脏脂肪和肝功能影响的研究_no.60

  
  镊子提起小鼠腹部的皮肤,然后用手术剪刀切开腹腔和胸腔。细观察鼠标的内部器官,小心地将它们分开,用生理盐水洗涤它们,用天平称重,最后将它们放入-20°C的冰箱中直至使用。验结束时,迅速分离腹部脂肪和肝脏,用滤纸擦拭组织液,称重并计算器官指数。算公式:器官指数(%)=湿器官重量/重量×100%。每组中,将右肝叶重约0.5g,并将重量(g):体积(ml)= 1∶9加入到均质化培养基中,在冰水浴中均质化。以2500 rpm离心10分钟。
  后,顺序稀释一部分上清液,并通过酶标仪测量原始肝液,2倍稀释度和4倍稀释度,并测量TG和TC含量。脂肪酶,甘油激酶,磷酸甘油氧化酶和过氧化物酶的作用下,甘油三酸酯产生的醌的色深与甘油三酸酯含量成正比(GPO-PAP方法)。的吸光度可用于计算样品中的甘油三酸酯含量。96孔板,并根据试剂盒操作表添加样品,充分混合,然后在生化培养箱中于37°C孵育10分钟。酶标仪的波长设置为492 nm,并确定每个试管的吸光度。据标准校准曲线计算样品中的TG含量。固醇酯酶,氧化酶和过氧化物酶催化胆固醇酯形成红色醌化合物。作步骤与2.5.1中相同,然后根据校准器的标准曲线计算样品中的TC含量。定溶液是10%福尔马林溶液,称取部分肝脏重量并浸入固定溶液中。过一系列组织病理学观察后,固定肝用HE染色。验期间,各组小鼠精神稳定,饮食正常,无异常表现或死亡。功建立NAFLD模型后,小鼠移动缓慢,活动量减少,体重减轻,与白色组相比,小鼠的粪便不整形,并有明显的粪便。油腻的感觉。旦动物中毒,受损器官的重量将发生变化,器官系数也将发生相应变化。据表3.2中的器官指数,将白色组与樟脑种子的籽油进行比较。察到两组的实验数据相似,并且器官与体重的比率相对恒定。现猪油和大豆油组的肝脏指数降低,表明肝脏萎缩和其他退行性变化,其中猪油组的肝脏损害最大。然恢复组的肝脏指数增加,表明器官充血,水肿或增生肥大等。脏是血脂和内源性脂蛋白合成和代谢的重要部位,与脂类代谢密切相关。过脂质代谢进入肝脏的脂肪在TG中连续合成,并以脂蛋白形式进入血液,形成动态平衡。内合成和功能的失衡将导致肝脏中TG的积累,并形成非酒精性脂肪肝疾病。表3.3所示,樟脑种子核组小鼠肝脏中TG的浓度与正常对照组无明显差异,而猪油小鼠肝脏中TG的浓度无明显差异。大豆油和自然恢复组明显高于对照组和樟树。的种子油。
  表3.4所示,樟脑种子核组小鼠肝脏中TC的浓度与正常对照组相比无显着差异,而猪油小鼠肝脏中TC的浓度无明显变化。大豆油组和自然恢复组明显高于正常对照组和樟脑籽油组。自自然恢复组,大豆油组和猪油组的小鼠的肝细胞在细胞质中表现出大小,圆度和张力变化的唇状囊泡。油组特别严重,肝细胞变得脂肪增多,肝组织受到影响。同程度的破坏。脑核心油组肝组织的细胞结构与正常对照组相似,结构完整,无变性或坏死。验结果表明,用MCD饮食诱导小鼠后,NAFLD模型组小鼠运动缓慢,活动量减少,体重减轻,大便有明显的油腻感,肝脏呈淡黄色,表明高脂肪食物会造成肝脏损害。实验中,樟脑种子仁油组小鼠的肝脏损伤较小。猪油和大豆油相比,樟脑籽仁油可以显着降低NAFLD小鼠肝脏中TG和TC的水平。织病理学观察表明,樟树籽仁油是一种健康无毒的油,能有效降低NAFLD小鼠的肝脂质水平,有利于肝功能的恢复,对肝功能有保护作用。

樟脑籽仁油对非酒精性脂肪性肝病小鼠肝脏脂肪和肝功能影响的研究_no.2

  脏,为患者提供了食用油的基准。
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