正在研究中选择的生长条件基本上相同幼苗每年两次原始肉桂作为原料用于生理参数的种植樟（MDA含量和抗氧化酶活性，在可溶性蛋白不同浓度的铅，镉和溶液倾倒测定游离脯氨酸含量）。果表明：不同浓度的Pb 2 ，镉2 应力，MDA含量略微高于或低于控制和总的趋势向上，以其浓度显著更高增加铅镉2 2 ，相比对照组，超氧化物歧化酶活性的变化不显著和POD的活性先增大后的Pb 2 应力diminuait.La低浓度导致在可溶性蛋白含量的减少显著云南植物叶片，而在Cd2 胁迫下，可溶性蛋白质含量没有显着下降。含量呈趋势hausse.Les上粘播种云南铅2 和Cd 2 的毒性作用différents.A10毫摩尔/ L，由镉2 的应力是最重要的毒性作用云南樟;铅和镉;压力;生理特征中图分类号：Q945.78文献标识码：A文章编号：1302至02年收到的（2015）01-0199-03日期：2014年2月15日基金项目：“省部级重点学科，实验室省级重点和学校实验室共享平台“，云南省资助项目;应用基础项目（No 2010ZC264）。者简介：唐燕（1991-），男，江苏句容，硕士生，茶资源研究主任。子邮件：tantan_1991@126.com。讯作者：程发，博士，景观研究植物分子生物学副教授，主要从事。子邮件：@ qq.com。着世界经济的发展，重金属污染已成为一个严重的问题。与在植物的生理和生化过程的重金属，诸如叶绿素的生物合成的抑制的植物，抑制参与植物的各种生理和生化过程的酶（例如，根还原酶，[各种氧化酶）和蛋白质生物合成的作用[1]，导致植物生长发育，甚至死亡。南，张有洁净的有毒物质空气的能力，我们有抗癌作用，吸烟可延缓沙地，空气中的灰尘，涵养水源，土壤和景观具有极高的经济价值和观赏价值，因此，云南樟新鲜，干净的过滤器，他成为了在许多城市和南部地区环境美化的首选。而，对云南重金属的研究很少，尤其是铅和镉胁迫。该实验中，健康的，衍生的生长条件基本上相同2年苗木樟铅，用不同浓度的Pb，重金属镉处理解决方案，在樟CD幼苗生理特性（包括内容MDA，在渗透调节物质和抗氧化酶活性的可溶性变化，以更好地理解糯米幼苗的响应机制重金属云南应力，并且提供了理论基础和指导科学家的云南鲤鱼。料和方法材料膨胀和培养所选择的测试云南樟脑（云南樟）2岁作为栽培材料，选择幼苗在2012年健康和稳定增长8月15日5L移植到塑料盆中，基质是粘土：珍珠岩：腐殖土ue = 3：3：2“混合基质。
验设计有5组在本实验：CK证人，Pb2 的治疗组A，Pb2 的治疗组B，Cd2 的治疗组A，Cd2 的治疗组B.每组6个盆，每盆一个。温室试验中，昼夜温度范围是20和30之间9和18 C和35％的相对湿度之间℃，夜晚温度范围°至80％。理时间为2012年9月10日至10月10日，共计一个月。有指标物在治疗结束时测量，并从顶部被选择的每个植物到第三的底部至第五完全展开的叶子作为生理生化指标，每个处理至少重复五次。
迫处理铅：用铅溶液处理（NO 3）2 5毫摩尔/ L（PB2 A组）和一个Pb溶液（NO3）2 10毫摩尔/ L（PB2 组B），10株通过处理每种菌株的10ml治疗溶液的当天均匀地倒入和对照组用新鲜水置换，然后加入到水足够量。力镉处理：用10 mmol / L的氯化镉溶液（CD2 A组）和用于治疗20毫摩尔/ L氯化镉溶液（CD2 B组），10，10的处理溶液毫升浇水由处理均匀地，用淡水代替对照组，然后用足量的水重新配制。二醛的元件和方法的测定的测定[2]片进行分析，以约0.2克样品，在10％的粉碎的6ml三氯乙酸，然后在12 000转/分钟离心10分钟。2ml上清液中除去和2ml 0.6％的硫代巴比妥酸是ajoutés.Après完全反应，将装有反应液的试管放置在沸水浴中30分钟，然后在冰浴中快速冷却。着，在10 000转/分10分钟，将上清液在440，532和600纳米使用分光光度计（UV的Unicam-330，美国）采取其吸光度。
抗氧化酶的材料判定采取约0.2g在5ml的提取缓冲液（50 mmol / L的磷酸氢二钠 - 磷酸二氢钠缓冲液，70 pH值，含有1毫摩尔/升EDTA，0的体积分数，将不溶于L）的05％Triton X-100.20g /聚乙烯吡咯烷酮研磨成匀浆。8000rpm离心20分钟后，除去上清液用于测量酶活性。氧化物酶（POD）：加入约100uL的酶提取液至3ml酶反应溶液（缓冲溶液50毫摩尔/ L磷酸二氢钠 - 磷酸氢二钠，pH为6.0的，含有3毫摩尔/ L愈创木酚和2在mmol / L H2O2中充分混合。紫外可见分光光度计上每2秒钟在2分钟内观察到470nm处的吸光度变化[3]。摩尔消光系数39.4mL /（mmol·cm）计算酶活性。氧化物歧化酶（EC1.15.1.1，SOD）：此实验确定硝基三唑（NBT）的超氧化物歧化酶的光的减少的基础上的酶活性的大小[4]。氧化性物质的存在下，核黄素可以光还原和还原的核黄素在有氧条件下容易被再氧化，以产生氧负离子，能够减少氮蓝四唑为甲蓝。者在560nm处具有最大吸收。SOD可以消除氧阴离子，从而抑制甲状腺功能亢进的形成。此，光还原反应后反应溶液较暗，表明酶活性较低，反之亦然。此基础上，可以计算酶活性的量。溶性蛋白质含量是通过用50毫摩尔/ L磷酸盐缓冲液（pH 7.8）来测定含有0.1毫摩尔/升EDTA和20g / L PVP]。
取0.2克叶子，用液氮研磨，添加5毫升提取物，再次粉碎直至匀浆，离心10分钟，除去上清，加入G-250反应，并测量吸光度在595nm处，参见Bradford等人。法[5]。离脯氨酸含量的测定游离脯氨酸的测定通过Bates等人的方法进行。[6]。样品用3％的磺基酸提取并以8000转/分钟进行10 min.The上清液匀浆用于测定游离脯氨酸。测定，该反应溶液由2毫升提取物，2ml的冰醋酸和2毫升茚三酮，并将反应物在停止的冷却器在沸水浴中沸腾60分钟后。后，加入4ml甲苯剧烈摇晃有色产物并使用上层有机层在520nm处测量吸光度。L-缬氨酸进行标准曲线。计分析所有数据分析均采用SPSS 11.5统计软件进行方差分析和手段多重比较使用测试Ducans进行单向进行。
异显着，p <0.05。果和铅，镉对MDA丙二醛（MDA）的应力的分析是膜，这是的质膜的脂质过氧化的电阻的所述内容的反射的脂质过氧化的终产物膜和损伤程度的重要指标。（图1）试验表明，与对照组中，Pb2 的含量MDA在一般趋势过程和Pb 2 的含量MDA A处理组镉下显著相比增加2 MDA云南樟脑植物的内容处理的浓度的增加是有上升的趋势和MDD在镉 B治疗组的含量增加显著相比于对照组。关铅和镉上叶片中抗氧化酶活性应力的效果表明（表1），应激相关的铅和镉云南植物的叶的抗氧化酶活性的影响是不同的。与对照组，
香樟树5毫摩尔/升铅离子在过氧化物酶（POD）增加的25.0％的活性，与铅离子的应力集中的进一步增加的方法相比，活性降低POD，10毫摩尔/ L对Pb2 POD处理POD活性的活性比对Pb2 治疗5毫摩尔/ L。与对照组比较，10毫摩尔/ L Cd2 的过氧化物酶活性显著下在这个过程中增加了对浓度显著进一步增加Cd2 的，则POD活性显著下降，20毫摩尔/ L Cd2 的POD活性在相比于对照组和10的活性处理处理后的POD mmol / L Cd2 分别下降30.30％和40.92％。于重金属的应力导致了超氧化物歧化酶（SOD）的活性的变化，但SOD活性的治疗的Pb 2 和Cd 2 的变化在本实验中是低的。1铅，镉应力SOD和过氧化物酶活性的交换基团处理过的SOD过氧化物酶[摩尔/（分钟·毫克）] CK727.46 18.02a1 860.90±±± 101.66bPb2 A733.10 30.54a2 325.61±242.82cPb2 B718.31 26.22a1 771.30±± 133.53bCd2 A728.87 9.31a2±195.49±401.54bcCd2 B736.15 8.61a1±296.99±220.21aP0.818ns0.002 * *注意：相同列数据后的不同字母表示显着差异，p <0.05。
个值代表5次重复的平均值±标准误差，下表是相同的。铅和上渗透调节物质镉应力的可溶性效果叶由铅和镉可溶性蛋白含量在叶中改变可溶性蛋白质结合的胁迫可以用作指示器检测叶片功能和植物衰老[7]。乎从图2中的可溶性蛋白在苗云南松的叶子内容显著在应力下Pb2 和Pb2 的治疗组A和B之间的可溶性蛋白含量降低为Pb2 的显着不同。暴露于Cd2 引起的应激时，可溶性蛋白质含量不会显着降低。
着Pb2 和Cd2 浓度的新增加，云南植物的可溶性蛋白质含量没有显着变化。的影响，镉强调脯氨酸试验显示内容（图3）时，应力的Pb 2 ，相比于对照组，樟条约的Pb2 的幼苗叶片一般朝向脯氨酸含量的趋势高和Pb2 处理组A的脯氨酸含量显着高于对照组。镉2 的压力，随着镉2 浓度，云南植物的叶子脯氨酸含量显著上升。指出，云南松幼苗能增加细胞的渗透势与脯氨酸积累和渗透调节的内容，以减少在压力下的组织脱水。论与讨论MDA是脂质过氧化产物之一，其含量可反映植物损伤程度。
量越高，对植物的伤害越大[8]。该实验中，与对照组相比，MDD的含量为略微高于或低于不同浓度的Pb 2 和Cd 2 的下控制显著更高，总的趋势是向上的。在在由Qi等人经受镉应力永荣桑树幼苗丙二醛含量的动态分析同样报告。9]他说，铅离子和Cd 2 胁迫下，云南植物活性氧增加叶片，打破活性氧的代谢平衡，导致严重的脂质过氧化膜和膜结构的破坏，导致细胞损伤。
SOD是植物的抗氧化剂体系，其可以减少由在细胞膜系统[10-12]活性氧物质损伤的主要保护酶。该实验中，随着Pb2 和Cd2 处理浓度的增加，SOD的活性没有显着变化。以前的研究[13]中也有类似报道。述POD的主要作用是消除由氧气和有机过氧化物产生的ROOH的代谢，其在植物中[14]中的抗氧化剂的代谢中起重要作用产生的过氧化氢。该实验中，铅2 和Cd 2 的应力下，POD的活性先增加后降低，表明当POD的活性随着应力的浓度的增加，植物通过增加保护酶的活性来清除体内。由基，当应力的浓度达到一定值时，POD活性开始下降，这可能是由于损坏超过植物的防御响应阈值电平，并且该结构或合成酶被破坏，导致POD活性丧失[15]。异SOD和POD也说明了不一样的动作和各种抗氧化酶发挥机制的压力的压力，但在这个测试中，云南樟树苗，主要通过增加活动POD铅离子，镉消除2 产生应激自由基，减轻其膜脂过氧化。
溶性蛋白质是重要的渗透调节剂。金属毒性可以刺激蛋白酶的水解活性，扭曲并降低了可溶性蛋白质，从而导致参与酶[16]许多的生理活性。该实验中，铅离子应力的低浓度导致在云南植物的叶子可溶性蛋白含量的显著减少，但应力镉2 下，可溶性蛋白含量并没有显著下降，这可能是不同重金属胁迫下可溶性蛋白质含量的变化。势不同，需要加深其原因。氨酸的含量为反映植物胁迫的重要指标，在维持细胞的体液平衡中起重要作用，并用于捕获活性氧物质[16-18]。该实验中，与对照组，铅的2 和Cd 2 增加的应力下脯氨酸含量进行比较，而对Pb2治疗组 A镉2 A和镉2 B的脯氨酸含量增加显著。连Cui等[19]的结果是一致的，这表明云南粘播种可以提高细胞的渗透势，通过增加脯氨酸的含量保持细胞的水平衡。外，在相同的浓度，镉治疗组 A的脯氨酸含量比的Pb 2 治疗组B的显著更高，表明镉2 在当时是更有害植物，并且该植物产生更多的脯氨酸以抵抗重金属。糟糕了。之，通过铅离子云南甲测量大多数生理指标均从控制显著不同，但在治疗对Pb2 B，所有测量的生理指标没有从对照和低浓度显著不同是分析。果压力铅离子对云南的苗木生理指标的影响很大，压力铅离子的浓度高，对生理指标没有显著影响。Cd2 的应力，与对照相比，由镉 B治疗组测量的生理指标均较治疗组镉更显著2 A.综合指标已经表明，镉2 应力的高浓度时有对云南苜蓿植物造成破坏。更大程度上。重金属离子的浓度相同，铅2 和Cd 2 ，云南的压抑的程度冷冻幼苗也有差异：10毫摩尔/ L，镉2 的应力更有害的粘种子云南。
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